一、試劑盒簡(jiǎn)介

EZBioscience 一步法升級版試劑盒，for microRNA直接用于從培養的細胞裂解物中快速方便地進(jìn)行逆轉錄。首先在細胞裂解緩沖液中裂解細胞以釋放微小RNA。然后，用gDNA去除劑處理細胞裂解液，以消除污染的基因組DNA。最后，聚腺苷酸化和逆轉錄在同一反應系統中一步完成。

EZBioscience 一步法升級版試劑盒，for microRNA包含6管試劑:細胞裂解緩沖液，gDNA去除劑，miRNART酶混合物，4xmiRNART緩沖液，正向U6引物和通用aPCR反向引物(Universal3'aPCR引物)，可用干所有miRNA的定量檢測。因此，aPCR反應僅需要每個(gè)靶標miRNA的特異性正向引物。

miRNART酶混合物主要包含大腸桿菌Poly(A)聚合酶，逆轉錄酶和RNase抑制劑。其中，大腸桿菌Poly(A)聚合酶不僅具有添加poly(A)尾部的高效率，而且可以特異性識別單鏈成熟miRNA，從而避免了具有雙鏈結構的miRNA前體的進(jìn)一步逆轉錄反應。M-MLV突變體逆轉錄酶具有很強的抗干擾能力和擴增能力，并且擴增效率特別好。

4x miRNA RT Buffer包含用干miRNA聚腺苷酸化和逆轉錄反應的所有原材料和引物，包括Oligo(dT)通用標簽引物，緩沖液和dNTPs，并經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，以確保多腺苷酸化和逆轉錄同時(shí)有效地進(jìn)行。

二、產(chǎn)品組分

三、保存條件 -20℃保存

四、試劑盒特點(diǎn)

無(wú)需提取RNA，直接裂解細胞，裂解產(chǎn)物經(jīng)過(guò)一步法快速高效的加尾、逆轉錄得到可用于qPCR檢測的所有 miRNA的cDNA。

30分鐘即可得到針對所有miRNA的cDNA，適用于5000個(gè)~50萬(wàn)細胞的miRNA快速檢測。

后續cDNA僅用于探針?lè )z測，需要與EZB-miProbe-RO、EZB-miProbe，FZB-miProbe-R1，EZB-miProbe-R2配套使用。