產(chǎn)品名稱(chēng)：Zymo EZ-96 DNA甲基化試劑盒-gold(D5008)現貨供應

產(chǎn)品貨號：D5008

產(chǎn)品品牌：Zymo

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

DNA甲基化是原核生物和真核生物中自然發(fā)生的事件。在原核生物中，DNA甲基化提供了一種保護宿主DNA免受限制性?xún)惹忻赶姆椒?，該內切酶旨在消除外?lái)DNA，而在高等真核生物中，DNA甲基化在基因表達的調節/控制中發(fā)揮作用。研究表明，異常DNA甲基化在癌癥中是一種廣泛的現象，可能是致癌過(guò)程中最早發(fā)生的變化之一。DNA甲基化也被證明在基因印跡、胚胎發(fā)育、X染色體基因沉默和細胞周期調控中發(fā)揮著(zhù)核心作用。在許多植物和動(dòng)物中，DNA甲基化包括通過(guò)甲基轉移酶在胞嘧啶環(huán)的第五個(gè)碳位置添加甲基。哺乳動(dòng)物的大多數DNA甲基化發(fā)生在5'-CpG-3'二核苷酸中，但也存在其他甲基化模式。事實(shí)上，哺乳動(dòng)物基因組中約80%的5'-CpG-3'二核苷酸被發(fā)現是甲基化的，而20%未甲基化的核苷酸大多位于啟動(dòng)子內或基因的第一外顯子中。

EZ-96 DNA 甲基化-Gold 試劑盒能夠在不到3個(gè)小時(shí)的時(shí)間內將未被甲基化的胞嘧啶大規模（96孔離心板）轉化成尿嘧啶。精心設計的亞硫酸氫鹽化學(xué)方法結合了DNA的熱變性和亞硫酸氫鹽轉化，以縮短孵育時(shí)間，并確保轉化率高達99%以上。通過(guò)提取的亞硫酸氫鹽轉化DNA，可以進(jìn)行PCR擴增，從而為下游分析提供理想的選擇，包括核酸內切酶消化、測序和微陣列等技術(shù)。

樣品處理：

1.將130µl的CT轉換試劑添加到轉換板中的每個(gè)DNA樣品的20µl*中。如果DNA樣品的體積小于20µl，則用水彌補差異。通過(guò)上下移液混合樣品。

2.用提供的薄膜密封板。將轉換板轉移到熱循環(huán)儀上，并執行以下步驟：

（1）98°C，持續10分鐘

（2）64°C，持續2.5小時(shí)

（3）4°C儲存長(cháng)達20小時(shí)

注：4°C儲存步驟是可選的。對于某些樣本，替代參數可能會(huì )產(chǎn)生更好的結果（見(jiàn)附錄）。如果您一直在使用該試劑盒，并在與上述不同的反應條件下獲得了良好的結果，您可以繼續使用相同的條件。

3.將600µl M-結合緩沖液添加到安裝在收集板上的Zymo Spin™I-96結合板的孔中。

注：結合板每孔的容量為1.1 ml。收集板每孔容量為800µl。必要時(shí)清空收集板，以防止污染。

4.將樣品從轉換板（步驟2）轉移到ZymoSpin™I-96結合板的孔中。通過(guò)上下移液混合。

5.以≥3000 x g（最大5000 x g）離心5分鐘。丟棄流通管。

6.向板的每個(gè)孔中加入400µl的M-Wash緩沖液。以≥3000 x g離心5分鐘。

7.向每個(gè)孔中加入200µl M-脫硫緩沖液，并使板在室溫（20-30°C）下靜置15-20分鐘。培養后，以≥3000 x g離心5分鐘。丟棄流通管。

產(chǎn)品選購：

北京百奧創(chuàng )新科技有限公司，現貨供應Zymo EZ-96 DNA甲基化試劑盒-gold(D5008)，歡迎選購！